Phân tích độ ổn định của một phương pháp xác định là một quá trình quan trọng để đánh giá khả năng của phương pháp đó trong việc cung cấp kết quả chính xác và đáng tin cậy. Trong nghiên cứu này, một phương pháp xác định đã được phát triển và đánh giá độ ổn định bằng cách sử dụng Thiết kế các thí nghiệm (DoE).

Thí nghiệm DoE là một phương pháp thống kê để đánh giá ảnh hưởng của các biến thể cố ý đối với quá trình phân tích. Nó cho phép xác định các yếu tố quan trọng và ranh giới tương ứng để đo lường sự ảnh hưởng của chúng đến độ chính xác của phương pháp.

Trong nghiên cứu này, hai thí nghiệm DoE độc lập đã được thực hiện để đánh giá ảnh hưởng của các yếu tố khác nhau đến độ chính xác của phương pháp xác định. Các yếu tố được chọn là tỷ lệ Polysorbate 20 /Poloxamer 188 , lượng Protein trên cột, lượng Polysorbate 20 trên cột và lượng Poloxamer 188 trên cột. Đối với mỗi yếu tố, một ranh giới dưới và ranh giới trên đã được xác định.

Các yếu tố và ranh giới của DoE độ ổn định cho điều kiện sắc ký đã được xác định. Các yếu tố này bao gồm % IPA trong bước gradient thứ hai, nhiệt độ cột, AcOH (%) và tốc độ dòng. Ranh giới dưới và ranh giới trên đã được xác định cho mỗi yếu tố này.

Bằng cách thực hiện các thí nghiệm DoE và đánh giá ảnh hưởng của các yếu tố và ranh giới đã chọn, nghiên cứu này đánh giá độ ổn định của phương pháp xác định được phát triển. Kết quả từ các thí nghiệm DoE này cung cấp thông tin quan trọng về khả năng phân tích của phương pháp trong việc xác định một loạt các công thức.

Tóm lại, nghiên cứu này sử dụng phương pháp DoE để kiểm tra độ ổn định của phương pháp xác định đã phát triển. Bằng cách xác định các yếu tố quan trọng và ranh giới tương ứng, nghiên cứu này cung cấp một đánh giá về khả năng phân tích của phương pháp trong việc xác định một loạt các công thức. Điều này giúp cải thiện độ tin cậy và chính xác của phương pháp xác định được sử dụng trong các ứng dụng thực tế.

Các thí nghiệm DoE đã cho phép xác định ảnh hưởng của các yếu tố khác nhau đến độ chính xác của phương pháp xác định. Với sự biến đổi các tham số trong DoE, độ ổn định của phương pháp đã được đánh giá dựa trên sự thay đổi của kết quả phân tích.

Đối với các yếu tố liên quan đến thành phần và lượng chất trên cột, tỷ lệ Polysorbate 20 /Poloxamer 188 và lượng Protein trên cột được xác định. Đối với tỷ lệ Polysorbate 20 /Poloxamer 188 , ranh giới dưới và ranh giới trên được đặt là 1 và 15 μg tương ứng. Điều này cho phép đánh giá ảnh hưởng của tỷ lệ này đến quá trình phân tích. Tương tự, đối với lượng Protein trên cột, ranh giới dưới và ranh giới trên được đặt là 0 và 2000 μg để đánh giá ảnh hưởng của lượng Protein đến kết quả phân tích.

Ngoài ra, các yếu tố liên quan đến điều kiện sắc ký cũng được xác định để kiểm tra độ ổn định của phương pháp. Đó là % IPA trong bước gradient thứ hai, nhiệt độ cột, AcOH (%) và tốc độ dòng. Các ranh giới dưới và ranh giới trên được đặt cho mỗi yếu tố để xác định phạm vi biến đổi của chúng. Điều này cho phép đánh giá ảnh hưởng của mỗi yếu tố đến quá trình phân tích và độ chính xác của kết quả.

Qua việc thực hiện các thí nghiệm DoE và đánh giá ảnh hưởng của các yếu tố và ranh giới đã chọn, nghiên cứu này cung cấp thông tin quan trọng về khả năng ổn định của phương pháp xác định đã phát triển. Kết quả từ các thí nghiệm này có thể giúp tối ưu hóa quy trình phân tích, xác định các yếu tố quan trọng và ranh giới để đạt được kết quả tốt nhất trong các ứng dụng thực tế.

Tổng quan, việc sử dụng phương pháp DoE để kiểm tra độ ổn định của phương pháp xác định là một phương pháp hữu ích để đánh giá và cải thiện độ chính xác và đáng tin cậy của phương pháp. Các thí nghiệm DoE cho phép xác định ảnh hưởng của các yếu tố và ranh giới đến quá trình phân tích, giúp tối ưu hóa quy trình và đảm bảo rằng phương pháp đáp ứng được yêu cầu chất lượng trong các ứng dụng thực tế.