Cửu Long Co LTD
Cung cấp hoá chất xử lý nước thải PAC
© 24/2/2024 - Vietnam12h.com Application
Giám sát sự phân hủy Polysorbate 80 trong các công thức protein bằng phương pháp sắc ký-tổ hợp phổ khối (LC-MS)

Trong lĩnh vực dược phẩm và công nghệ sinh học, đảm bảo tính ổn định và tính toàn vẹn của các công thức protein là quan trọng hàng đầu. Một thách thức phổ biến trong việc duy trì chất lượng của các công thức này là sự phân hủy của các thành phần bổ sung, chẳng hạn như chất hoá học. Polysorbate 80 (Tween 80) là một loại chất hoá học không cơ phổ biến trong các công thức protein, nổi tiếng với khả năng ổn định protein và tăng cường tính tan của chúng. Tuy nhiên, polysorbate 80 dễ bị phân hủy theo thời gian, điều này có thể ảnh hưởng tiêu cực đến tính ổn định tổng thể của công thức protein. Để giải quyết vấn đề này, sắc ký-tổ hợp phổ khối (LC-MS) đã xuất hiện như một phương pháp phân tích mạnh mẽ để theo dõi sự phân hủy của polysorbate 80 trong các công thức protein, đặc biệt khi kết hợp với quá trình trích chất bằng rắn (SPE) để loại bỏ protein.

Tầm quan trọng của Polysorbate 80 trong Các Công thức Protein

Polysorbate 80 là một dẫn xuất polyoxyethylene của sorbitan monooleate và được sử dụng rộng rãi trong ngành dược phẩm và công nghệ sinh học. Vai trò chính của nó trong các công thức protein là ngăn ngừng sự tập tục của protein, cải thiện tính tan protein và tăng cường tính ổn định của sản phẩm sinh học. Polysorbate 80 đạt được điều này bằng cách tạo ra một lớp bảo vệ xung quanh protein, bảo vệ nó khỏi các yếu tố căng thẳng khác nhau, chẳng hạn như nhiệt độ, khuấy động và lực cắt. Chất hoá học này thường được tìm thấy trong các công thức kháng thể đơn lẻ, vắc xin và các sản phẩm sinh học dựa trên protein khác.

Tuy nhiên, polysorbate 80 không miễn nhiễm khỏi sự phân hủy và phân hủy này có thể được kích thích bởi một số yếu tố, bao gồm tiếp xúc với nhiệt độ, căng thẳng oxi hóa và việc lưu trữ kéo dài. Khi polysorbate 80 phân hủy, nó có thể dẫn đến việc hình thành các chất sản phẩm phân hủy và các sản phẩm tạo nên sẽ ảnh hưởng tiêu cực đến sự an toàn và hiệu quả của sản phẩm protein. Vì vậy, quan trọng là theo dõi và quản lý sự phân hủy của polysorbate 80 trong các công thức protein.

Sắc ký-tổ hợp phổ khối (LC-MS): Một Công cụ Phân tích Mạnh mẽ

Sắc ký-tổ hợp phổ khối (LC-MS) là một kỹ thuật phân tích đa dạng đã trở nên phổ biến trong ngành dược phẩm vì khả năng của nó để tách, phát hiện và định lượng các hợp chất khác nhau với độ nhạy và độ đặc hiệu cao. LC-MS kết hợp khả năng tách hợp chất của sắc ký lỏng với phân tích phổ khối của máy phân tích phổ khối, tạo nên một phương pháp mạnh mẽ để phân tích các hỗn hợp phức tạp.

Trong ngữ cảnh theo dõi sự phân hủy của polysorbate 80, LC-MS có thể xác định và định lượng các sản phẩm phân hủy và tạp chất có thể hình thành trong quá trình phân hủy. Kỹ thuật này cho phép xác định chính xác thành phần hóa học của polysorbate 80 và các sản phẩm phân hủy của nó, giúp người nghiên cứu và các nhà khoa học có cơ hội để có được thông tin quý giá về các cơ chế và động học của quá trình phân hủy.

Trích chất bằng rắn (SPE) để loại bỏ protein

Các công thức protein thường chứa một nồng độ protein cao cùng với polysorbate 80. Để phân tích phân hủy của polysorbate 80 một cách chính xác, quan trọng là loại bỏ protein khỏi mẫu để tránh sự can thiệp với phân tích LC-MS. Trích chất bằng rắn (SPE) là một phương pháp chuẩn để chuẩn bị mẫu có thể loại bỏ protein hiệu quả từ ma trận mẫu.

SPE sử dụng một giai đoạn rắn (thường là một chất hấp thụ) để giữ protein một cách chọn lọc trong khi cho phép polysorbate 80 và các sản phẩm phân hủy của nó thông qua. Các protein được cô lập sau đó có thể được thu và loại bỏ, để lại một mẫu sạch cho phân tích LC-MS tiếp theo. Bằng cách tích hợp SPE vào quy trình phân tích, người nghiên cứu có thể thu được kết quả chính xác và đáng tin cậy hơn khi theo dõi sự phân hủy của polysorbate 80 trong các công thức protein.

Quy trình phân tích LC-MS

Quá trình theo dõi sự phân hủy của polysorbate 80 trong các công thức protein bằng LC-MS và SPE bao gồm một số bước quan trọng:

Chuẩn bị mẫu: Bắt đầu bằng việc chuẩn bị mẫu công thức protein cho phân tích. Điều này bao gồm pha loãng, thêm chuẩn nội, và làm axit để tạo điều kiện thuận lợi cho việc phát hiện các sản phẩm phân hủy.

Trích chất bằng rắn (SPE): Thực hiện trích chất bằng rắn để loại bỏ protein khỏi ma trận mẫu, để lại một mẫu tinh khiết chứa polysorbate 80 và các sản phẩm phân hủy của nó.

Sắc ký tách: Tiêm mẫu tinh khiết vào hệ thống sắc ký lỏng, nơi việc tách chất được thực hiện dựa trên các tính chất hóa học của chúng, chẳng hạn như độ phân cực và độ thân nước.

Phát hiện MS: Các chất đã tách được đưa vào máy phân tích phổ khối, nơi chúng được ion hóa và đưa vào phân tích phổ khối. Máy phân tích phổ khối cung cấp thông tin về tỷ lệ khối lượng-điện tích của các hợp chất, cho phép xác định và định lượng polysorbate 80 và các sản phẩm phân hủy của nó.

Phân tích dữ liệu: Phân tích dữ liệu LC-MS để xác định và định lượng các sản phẩm phân hủy và tạp chất. Phân tích này có thể cung cấp thông tin về mức độ và động học của sự phân hủy của polysorbate 80 trong công thức protein.

Kết luận

Theo dõi sự phân hủy của polysorbate 80 trong các công thức protein là quan trọng để đảm bảo tính ổn định và chất lượng của sản phẩm sinh học. Sắc ký-tổ hợp phổ khối, khi kết hợp với trích chất bằng rắn để loại bỏ protein, cung cấp một phương pháp phân tích mạnh mẽ và chính xác cho mục đích này. Bằng cách xác định và định lượng các sản phẩm phân hủy và tạp chất, người nghiên cứu và các công ty dược phẩm có thể thực hiện các biện pháp thông tin để giảm thiểu tác động tiêu cực của sự phân hủy polysorbate 80, cuối cùng làm tăng tính an toàn và hiệu quả của các sản phẩm dựa trên protein. Phương pháp phân tích này là một minh chứng cho sự phát triển liên tục của phân tích dược phẩm, liên tục tiến bộ để đáp ứng nhu cầu của ngành công nghiệp.